每一项移植治疗技术应当有完整的标准操作规范，应申请国家或地方相关部门的审批，并经医院伦理委员会和新技术委员会批准。

负责骨髓、外周血、脐血、脐带采集以及干细胞分离的专业人员需要经过相关的业务培训。患者的选择和干细胞的移植需要由相关专业副主任医师以上的人员来负责实施。

实验室洁净度达1万级，需要有生物安全柜、离心机和超净工作台。拟开展外周血干细胞移植的单位要有血细胞分离机。进行干细胞表型检测的还需要流式细胞仪。

①各种病因导致的失代偿期肝硬化；②近1年内，虽经内科积极治疗，病情仍反复加重，至少因肝硬化并发症如大量腹水、自发性腹膜炎、消化道出血或肝性脑病住院1次以上；③需间断补充血浆白蛋白及口服利尿剂治疗；④血浆白蛋白小于35g/L，总胆红素小于170μmol/L，凝血酶原活动度大于30%(凝血酶原时间小于20秒)，大量腹水控制到中等以下，自发性腹膜炎及肝性脑病已治愈，Child-Pugh评分大于等于7分；⑤外周血血红蛋白浓度大于70g/L，血小板计数大于5×10 ⁹/L，血细胞比容大于0.25；⑥近1个月内无消化道出血病史；⑦无条件接受原位肝移植；⑧自愿签署知情同意书。

①合并肝脏或其他脏器的恶性肿瘤；②并发消化道出血、自发性腹膜炎、肝性脑病、肝肾综合征以及急性感染发作期；③有严重的心、肺、肾或血液系统疾病；④妊娠或哺乳期妇女；⑤对G-CSF、造影剂及抗凝剂过敏者；⑥有药瘾或酒精成瘾者。

由于失代偿期肝硬化患者病情重，病程长，对干细胞移植治疗缺乏了解以及手术时亲人不在身边等原因，患者术前会焦躁不安，缺乏安全感。应详细地向患者及其家属讲解干细胞移植方法的优点及其不足之处，使患者及其家属对干细胞移植治疗有一个正确的认识。并注意说明干细胞移植的过程，必要时可通过既往的视频和宣传手册让患者了解治疗过程，或向患者介绍以往成功病例，以消除患者紧张心理，增强患者的治疗信心。

对于需要抽取骨髓以及需要经肝动脉移植的患者，要对取髓和股动脉穿刺部位备皮。术前进行碘过敏试验。术前6小时禁食水，可通过静脉输液保证患者的基本营养和能量需求。

骨髓血、外周血、脐血和脐带的收取、转运应有专人负责，并做好标识和记录。制备过程必须在1万级洁净实验室内按照标准操作流程进行，并严格无菌操作。根据干细胞种类和移植要求的不同，选择使用密度梯度离心法、免疫磁珠法、流式细胞仪分选法或全自动血细胞分离机进行干细胞的分离富集。需要体外培养和扩增的干细胞在培养过程中需要注意定期更换培养液、及时传代。脐血干细胞和间充质干细胞可按照标准程序冻存于液氮罐，使用前按照标准程序解冻复苏。制备的干细胞可用生理盐水稀释到需要的容积，建议在2小时内进行干细胞移植。稀释于生理盐水的干细胞只能在4℃冰箱短时间保存。可通过细胞计数和活力测定对干细胞进行质量检测，有条件的可使用流式细胞仪进行干细胞表型的鉴定。

一般经肝动脉或外周静脉途径进行干细胞移植。

在局麻下穿刺股动脉，放置动脉鞘管；用导丝和导管选择到肝固有动脉进行造影，观察肝内血管情况及有无占位性病变；将干细胞悬液经左右肝动脉缓慢注入；术毕拔管，穿刺点加压包扎后返回病房。

取肘前正中静脉或前臂静脉穿刺建立静脉通道，可先输注地塞米松1mg、葡萄糖酸钙20ml，以生理盐水冲管，之后缓慢输入干细胞悬液，最后以10ml生理盐水冲管。

1.术后根据需要应用抗生素。

2.对于经肝动脉途径进行干细胞移植的患者，穿刺侧下肢一般需要制动6小时，并卧床24小时。

3.术后可连续使用促肝细胞生成素3～5天。

目前临床应用尚未发现严重的不良事件。已经报道的安全性事件主要是术后低热和恶心，多为自限性。少见的事件有穿刺点出血和血肿、穿刺点疼痛、肝区不适，经对症处理后可缓解。曾报道术后10天发生自发性腹膜炎合并嗜血细胞综合征1例 ^[33]，但尚不能确定是否与干细胞移植有关。但专家们一致认为，由于干细胞移植的临床应用时间较短，目前仍应密切注意干细胞移植后是否会发生免疫排斥和诱发肿瘤，也应注意肝肾等重要脏器功能的变化。一旦出现严重不良事件应按规定报告医院以及相关主管部门。

由于失代偿期肝硬化尤其是并发腹水和(或)上消化道出血的患者死亡率高、生存期短，因此应注重以生存期作为主要指标来评价干细胞移植治疗的效果。肝脏合成功能、临床表现等可作为次要评价指标。

加强对患者的术后随访，以死亡作为随访的硬终点。

以血清白蛋白水平为主，兼顾血清胆固醇、胆碱酯酶水平和凝血酶原活动度。此四项指标可在一定程度上反映肝脏的合成功能。其他生化指标还包括转氨酶、胆红素、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶和甲胎蛋白等。

这两个评分指标能比较准确地反映肝脏的储备功能。

多数临床报道显示，干细胞移植可有效减轻失代偿期肝硬化患者的乏力、食欲缺乏、腹胀等症状，并可促进腹水的消退。

借助Fibroscan、Fibrotest等检测干细胞移植前后肝脏纤维化程度的变化。

可通过B超、CT和磁共振检查观察肝脾尺寸或容积以及门静脉和脾静脉内径的变化。也可借助上消化道内镜观察食管胃底静脉曲张和门脉高压性胃肠病的改善情况。

对于条件合适的患者，可通过比较术前术后的肝脏穿刺活检明确干细胞移植对肝脏病理学的影响。由于该检查有一定的创伤，建议谨慎使用。

建议术后第1、3、6和12个月各随访1次，第2年每3个月随访1次，此后每半年随访1次。每次随访均应注意生存期，并检查血液生化指标、临床症状(包括失代偿期肝硬化各种并发症表现)以及MELD评分和Child-Pugh评分的变化。每半年进行一次影像学和肝纤维化指标的检测，并注意观察有无肿瘤发生。如果患者具备接受肝脏穿刺活检的条件，建议在干细胞移植术后1～2年时进行。

参加人员：本专家共识由中华医学会医学工程学分会干细胞工程专业学组颁布，经过国内消化、肝病和干细胞研究等专业的30余名专家，如樊代明(原第四军医大学)、付小兵(中国人民解放军总医院)、魏来(北京大学人民医院)、谷涌泉(首都医科大学宣武医院)、谭建明(南京军区福州总医院)、张传森(中国人民解放军第二军医大学)、韩忠朝(中国医学科学院)、高志良(中山大学第三附属医院)、王福生(中国人民解放军第302医院)、郭晓钟(沈阳军区总医院)、蒋明德(成都军区总医院)、陈东风(中国人民解放军第三军医大学大坪医院)、胡大荣(北京军区总医院)、汪芳裕(南京军区总医院)等反复讨论共同修改完成。